блокировка экрана
градиент




Как находят саму трепонему?
Прямые методы диагностики сифилиса: микроскопия, ПЦР, РИФ-Тр

Прямые методы диагностики основаны на обнаружении в организме человека конкретных представителей инфекции. Достаточно найти хотя бы кусок микроба — его ДНК. Положительные результаты таких анализов будут самыми достоверными: если возбудитель найден, то болезнь считается доказанной, а диагноз обоснованным. Однако для диагностики сифилиса этот тип исследований используется не так широко, как для диагностики других половых инфекций. Дело в том, что бледную трепонему не так-то легко найти: при заражении она не задерживается в очаге поражения на коже, а быстро проникает внутрь и укрывается в тканях и лимфатических путях. И «ловить» ее уже остается только непрямыми методами, ориентируясь по реакции организма — антителам, которые образуются в крови в ответ на ее появление.


 

 

И все же, прямые методы применяются не только на самой ранней стадии, но и при вторичном сифилисе, и даже третичном. Зачем и как — рассказываем дальше.

Прямые методы диагностики – когда их назначают?

пцр при сифилисеВ диагностике сифилиса прямое обнаружение возбудителя не является основным. Эти исследования используют только для подтверждения результатов анализов крови. Такое второстепенное положение обусловлено тем, что если выявить микроб не удалось — результат их будет отрицательным, но наличия болезни этот факт не исключит. То есть, положительный результат — это точно сифилис, а отрицательный — совсем не обязательно отсутствие болезни.

Чаще всего прямые методы используются для подтверждения сифилиса в ранний период.

В первичный период исследуют материал, взятый из твердого шанкра — тканевую жидкость со дна сифилитической язвы. В это время прямые методы имеют большое преимущество над непрямыми: они могут подтвердить диагноз уже в первые недели твердого шанкра, когда другие анализы еще «не видят» сифилис в крови.

Во вторичный период исследуют соскоб, взятый из элементов сифилитической сыпи. В этот период прямые тесты назначаются редко, только в сомнительных случаях. В этот период непрямые методы работают гораздо точнее.

Поздний сифилис часто путают с пролеченным сифилисом, после которого многие непрямые тесты остаются положительными. Для подтверждения диагноза иногда прибегают к прямым методам диагностики. С помощью них исследуют пунктат лимфоузлов, в которых еще могут сохраняться бактерии.

Еще прямые методы диагностики используют для постановки диагноза «врожденный сифилис». С этой целью исследуют амниотическую жидкость, ткань пуповины, плаценты и органы плода.

Что относится к прямым методам диагностики, и какой из них самый лучший?

К прямым методам диагностики сифилиса, применяющимся в клинической практике, относятся:

       ТПМ — темнопольная микроскопия
       РИФТр — прямая реакция иммунофлюоресценции
       ПЦР — полимеразная цепная реакция

диагностика сифилисаТемнопольная микроскопия основана на обнаружении бледных трепонем под световым микроскопом. Бледная трепонема плохо окрашивается лабораторными красителями (отсюда и название — бледная), поэтому ее рассматривают в необработанном, живом состоянии на темном фоне. Направленный луч света преломляется, проходя через бледных трепонем, и подсвечивает их. Лаборант оценивает размер, форму и типы движения бактерий, а также подсчитывает их количество. Недостатки метода:

  • субъективность, зависит от внимательности лаборанта;
  • зависит от качества приготовления материала: бактерии должны быть живыми и в большом количестве;
  • повышенная вероятность ложноположительных результатов: бледную трепонему можно визуально спутать с другими непатогенными микробами.

Достоинство этого метода только одно — дешевизна.

РИФ-Тр основан на специальном окрашивании бледных трепонем с помощью флюорисцирующих антител. Если бледные трепонемы имеются в изучаемом материале, то под микроскопом и специальным освещением они проявятся в виде яркого свечения. Этот метод менее субъективен, чем ТПМ, но дороже. В России он почти не применяется.

ПЦР основан на обнаружении ДНК бледной трепонемы в исследуемом материале. Он намного точнее, чем ТПМ и РИФ. Приготовление материала не вызывает трудностей: если в материале есть бледные трепонемы, то не важно, единственная это бактерия или их множество, живые они или нет — ПЦР должен показать положительный результат. Кроме того, этот метод полностью автоматизирован и не зависит от человека. Однако ложноотрицательные результаты встречаются все же часто, для скрининга на сифилис метод непригоден. Еще он, также как и РИФ, является дорогим и применяется редко.

Резюмируем важное про прямые методы диагностики сифилиса:

  1. Материалы для исследования — отделяемое твердого шанкра и высыпания вторичного периода или пунктат лимфоузла.
  2. Устанавливается присутствие самой бледной трепонемы или ее ДНК.
  3. В диагностике сифилиса являются второстепенными, и используются только для подтверждения болезни.
  4. Могут быть положительными уже в первые недели с момента появления твердого шанкра.
  5. После выздоровления всегда будут показывать отрицательный результат (непрямые методы могут оставаться положительными).

Достоинства:

  • Возможность диагностики на самом раннем этапе, когда серологические тесты ещё отрицательны.
  • Высокая специфичность (97–100%): при положительных результатах сифилис считается доказанным.

Недостатки:

  • Нельзя использовать для контроля эффективности лечения: они не имеют количественной оценки и не способны оценить — стало ли бактерий в организме в целом меньше или нет.
  • Довольно большое количество ложноотрицательных результатов: Если взять всех больных свежим сифилисом и провести его диагностику с помощью прямых методов, то 7–8 результатов из 10 будут положительными, и 2–3 отрицательными.
  • Невозможность подтверждения скрытого сифилиса.